Difference between revisions of "Team:NCKU Tainan/Model"

 
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         <div class="container content">
 
         <div class="container content">
        <h1 class="head">Model</h1>
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            <div class="headstyle">
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                <h1 class="head">Model</h1>
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            </div>
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            <div class="righttitle">
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                <h6 class="subtitle">Prediction of Metabolism</h6>
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            </div>
 
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                         <div id="sidelist" class="list-group">
 
                             <a class="list-group-item list-group-item-action" href="#achievement">Achievement</a>
 
                             <a class="list-group-item list-group-item-action" href="#achievement">Achievement</a>
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                             <a class="list-group-item list-group-item-action" href="#CO2_metabolism">CO<sub>2</sub> metabolism</a>
 
                             <a class="list-group-item list-group-item-action" href="#CO2_metabolism">CO<sub>2</sub> metabolism</a>
 
                             <a class="list-group-item list-group-item-action" href="#CO2_vs_xylose">Analysis</a>
 
                             <a class="list-group-item list-group-item-action" href="#CO2_vs_xylose">Analysis</a>
                             <a class="list-group-item list-group-item-action" href="#reference">Reference</a>
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                             <a class="list-group-item list-group-item-action" href="#references">References</a>
 
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                         </div>
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                                         </ol>
 
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                                     </div>
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                                    <img class="gif" src="https://static.igem.org/mediawiki/2018/b/bb/T--NCKU_Tainan--model_model.gif" alt="Model">
 
                                     <br>
 
                                     <br>
 
                                     <p class="pcontent">In order to achieve these two goals, we try to figure out three main questions:</p>
 
                                     <p class="pcontent">In order to achieve these two goals, we try to figure out three main questions:</p>
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                                         <li class="licontent"><a class="link" href="#CO2_uptake">Amount of CO<sub>2</sub> uptake by <i>E. coli</i></a></li>
 
                                         <li class="licontent"><a class="link" href="#CO2_uptake">Amount of CO<sub>2</sub> uptake by <i>E. coli</i></a></li>
 
                                         <li class="licontent"><a class="link" href="https://2018.igem.org/Team:NCKU_Tainan/Kinetic_Law">CO<sub>2</sub> flux in <i>E. coli</i> metabolism</a></li>
 
                                         <li class="licontent"><a class="link" href="https://2018.igem.org/Team:NCKU_Tainan/Kinetic_Law">CO<sub>2</sub> flux in <i>E. coli</i> metabolism</a></li>
                                         <li class="licontent"><a class="link" href="https://2018.igem.org/Team:NCKU_Tainan/Analyse">Amount of Carbon fixed in biomass</a></li>
+
                                         <li class="licontent"><a class="link" href="https://2018.igem.org/Team:NCKU_Tainan/Analysis">Amount of Carbon fixed in biomass</a></li>
 
                                     </ol>
 
                                     </ol>
 
                                 </div>
 
                                 </div>
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                                         even more effective to achieve the optimization parameters in the model.  
 
                                         even more effective to achieve the optimization parameters in the model.  
 
                                         Therefore, we can save time to try and error on doing experiment.
 
                                         Therefore, we can save time to try and error on doing experiment.
                                         After that, we can analyze the rate of production and consumption.  
+
                                         After that, we analyze the rate of production and consumption.  
                                         In this way, we can calculate the amount of carbon dioxide uptake into the Escherichia coli (<i>E.coli</i>) and  
+
                                         In this way, we can calculate the amount of CO<sub>2</sub> uptake into the  
                                         calculate how many CO<sub>2</sub> can be used in our system.  
+
                                        <i>Escherichia coli </i> ( <i>E. coli</i> ) and  
                                         In addition, we also want to realize how much carbon we can fix.  
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                                         calculate how much CO<sub>2</sub> will be used in our system.  
                                         We have to understand what’s going on in <i>E. coli</i> after uptaking CO<sub>2</sub>.  
+
                                         In addition, we also want to realize how much carbon being fixed in our system.  
                                         Since we integrated non-native carbon fixation pathway into <i>E. coli</i> to let <i>E. coli</i> utilize CO<sub>2</sub>,  
+
                                         We have to understand the process in <i>E. coli</i> after uptaking  
                                         we can simplify the CO<sub>2</sub> utilization pathway in engineered <i>E. coli</i> into two parts,  
+
                                        CO<sub>2</sub>.  
 +
                                         Since we integrated non-native carbon fixation pathway into <i>E. coli</i> to let  
 +
                                        <i>E. coli</i> utilize CO<sub>2</sub>,  
 +
                                         we simplify the CO<sub>2</sub> utilization pathway in engineered <i>E. coli</i>  
 +
                                        into two parts,  
 
                                         <a class="link" href="#CO2_uptake">CO<sub>2</sub> uptake</a> and <a class="link" href="#CO2_metabolism">CO<sub>2</sub> metabolism</a>.
 
                                         <a class="link" href="#CO2_uptake">CO<sub>2</sub> uptake</a> and <a class="link" href="#CO2_metabolism">CO<sub>2</sub> metabolism</a>.
 
                                     </p>
 
                                     </p>
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                                     <p class="pcontent">Follow our model progress diagram with a better sense of how we achieve our goal.</p>
 
                                     <p class="pcontent">Follow our model progress diagram with a better sense of how we achieve our goal.</p>
 
                                     <div class="row">
 
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                                             <h4 class="pb">Purpose of model</h4>
 
                                             <h4 class="pb">Purpose of model</h4>
 
                                             <p class="pb">How many CO<sub>2</sub> can be used by <i>E. coli</i></p>
 
                                             <p class="pb">How many CO<sub>2</sub> can be used by <i>E. coli</i></p>
 
                                         </div>
 
                                         </div>
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                                             <a class="methodlink" href="https://2018.igem.org/Team:NCKU_Tainan/Kinetic_Law">
 
                                             <a class="methodlink" href="https://2018.igem.org/Team:NCKU_Tainan/Kinetic_Law">
 
                                                 <h4 class="pb">Method of model</h4>
 
                                                 <h4 class="pb">Method of model</h4>
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                                             </a>
 
                                             </a>
 
                                         </div>
 
                                         </div>
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                                         <div class="col-8" id="cube1">
                                             <a class="methodlink" href="https://2018.igem.org/Team:NCKU_Tainan/Kinetic_Law">
+
                                             <a class="methodlink" href="https://2018.igem.org/Team:NCKU_Tainan/Analysis">
 
                                                 <h4 class="pb">Collect experiment data</h4>
 
                                                 <h4 class="pb">Collect experiment data</h4>
 
                                             </a>
 
                                             </a>
 
                                         </div>
 
                                         </div>
                                         <div class="col-3"></div>
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                                     </div>
 
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                                         <div class="col-8" id="cube3">
                                             <a class="methodlink" href="https://2018.igem.org/Team:NCKU_Tainan/Analyse">
+
                                             <a class="methodlink" href="https://2018.igem.org/Team:NCKU_Tainan/Analysis">
 
                                                 <h4 class="pb">Result analysis</h4>
 
                                                 <h4 class="pb">Result analysis</h4>
 
                                             </a>
 
                                             </a>
 
                                         </div>
 
                                         </div>
                                         <div class="col-3"></div>
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                                         <div class="col-2"></div>
 
                                     </div>
 
                                     </div>
 
                                 </div>
 
                                 </div>
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                                         Therefore, <i>E. coli</i> uptake CO<sub>2</sub> by diffusion.  
 
                                         Therefore, <i>E. coli</i> uptake CO<sub>2</sub> by diffusion.  
 
                                         However, the native diffusion rate is really low, not to mention the dissolved rate.  
 
                                         However, the native diffusion rate is really low, not to mention the dissolved rate.  
                                         We clone <a class="link" href="https://2018.igem.org/Team:NCKU_Tainan/Kinetic_Law">CA (carbonic anhydrase)</a> gene to speed up the diffusion rate.  
+
                                         We clone CA (carbonic anhydrase) gene to speed up the diffusion rate.  
 
                                         The higher diffusion rate, the higher CO<sub>2</sub> concentration maintained in engineered <i>E. coli</i>.  
 
                                         The higher diffusion rate, the higher CO<sub>2</sub> concentration maintained in engineered <i>E. coli</i>.  
 
                                         Higher CO<sub>2</sub> concentration in engineered <i>E. coli</i> provides more steady CO<sub>2</sub> condition for downstream pathway.</p>
 
                                         Higher CO<sub>2</sub> concentration in engineered <i>E. coli</i> provides more steady CO<sub>2</sub> condition for downstream pathway.</p>
Line 136: Line 146:
 
                                                     <tr>
 
                                                     <tr>
 
                                                         <th colspan="4">CO<sub>2</sub> uptake</th>
 
                                                         <th colspan="4">CO<sub>2</sub> uptake</th>
                                                         <th colspan="2">Kf</th>
+
                                                         <th colspan="2">K<sub>f</sub> (mM)</th>
                                                         <th colspan="2">Kr</th>                                                         
+
                                                         <th colspan="2">K<sub>r</sub> (mM)</th>                                                         
 
                                                     </tr>
 
                                                     </tr>
 
                                                     <tr>
 
                                                     <tr>
Line 166: Line 176:
 
                                                         <td colspan="1" rowspan="2">R5</td>
 
                                                         <td colspan="1" rowspan="2">R5</td>
 
                                                         <td colspan="3" rowspan="2">$${[H^+] + [HCO_3^-] \longleftrightarrow [H_2O] + [CO_2]_{uptake}}$$</td>
 
                                                         <td colspan="3" rowspan="2">$${[H^+] + [HCO_3^-] \longleftrightarrow [H_2O] + [CO_2]_{uptake}}$$</td>
                                                         <td colspan="2">Vmax</td>
+
                                                         <td colspan="2">V<sub>max</sub></td>
                                                         <td colspan="2">Km</td>
+
                                                         <td colspan="2">K<sub>m</sub></td>
 
                                                     </tr>
 
                                                     </tr>
 
                                                     <tr>
 
                                                     <tr>
Line 185: Line 195:
 
                                             <div class="col-12" id="resultimg">
 
                                             <div class="col-12" id="resultimg">
 
                                                 <img class="twoimg" src="https://static.igem.org/mediawiki/2018/7/75/T--NCKU_Tainan--model_result1.png">
 
                                                 <img class="twoimg" src="https://static.igem.org/mediawiki/2018/7/75/T--NCKU_Tainan--model_result1.png">
                                                 <p class="pcontent">Fig. 2 CO<sub>2</sub> uptake amount change with time in engineered <i>E. coli</i> without CA gene.</p>
+
                                                 <p class="pcenter">Fig 1. CO<sub>2</sub> uptake amount change with time in engineered <i>E. coli</i> without CA gene.</p>
 
                                                 <img class="twoimg" src="https://static.igem.org/mediawiki/2018/9/9f/T--NCKU_Tainan--model_result2.png">
 
                                                 <img class="twoimg" src="https://static.igem.org/mediawiki/2018/9/9f/T--NCKU_Tainan--model_result2.png">
                                                 <p class="pcontent">Fig. 3 CO<sub>2</sub> uptake amount change with time in engineered <i>E. coli</i> with CA gene.</p>
+
                                                 <p class="pcenter">Fig 2. CO<sub>2</sub> uptake amount change with time in engineered <i>E. coli</i> with CA gene.</p>
 
                                             </div>
 
                                             </div>
 
                                         </div>           
 
                                         </div>           
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                                             <img class="col-md-6" id="easypathway" src="https://static.igem.org/mediawiki/2018/f/f8/T--NCKU_Tainan--model_easypathway.png">
 
                                             <img class="col-md-6" id="easypathway" src="https://static.igem.org/mediawiki/2018/f/f8/T--NCKU_Tainan--model_easypathway.png">
 
                                             <img class="col-md-6 contentimg" src="https://static.igem.org/mediawiki/2018/3/3e/T--NCKU_Tainan--model_pathway.png">
 
                                             <img class="col-md-6 contentimg" src="https://static.igem.org/mediawiki/2018/3/3e/T--NCKU_Tainan--model_pathway.png">
                                             <p class="pcontent col-12">Fig. 4 Metabolic pathway of CO<sub>2</sub>-utilization <i>E. coli</i>.  
+
                                             <p class="pcenter col-12">Fig 3. Metabolic pathway of CO<sub>2</sub>-utilization <i>E. coli</i>. </p>
                                                The introduced CO<sub>2</sub>-utilization bypass pathway composed of PRK and Rubisco is drawn in green line and noted by ” A” reaction,  
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                                            <p class="pcontent col-12">The introduced CO<sub>2</sub>-utilization bypass pathway composed of PRK and Rubisco is drawn in green line and noted by ” A” reaction and the double line was the pathway that composed by genetically modified, while the central carbon metabolic pathway including PP pathway and TCA cycle is drawn in blue line and yellow line and noted by “B” reaction and “C” reaction, respectively.
                                                while the central carbon metabolic pathway including PP pathway and TCA cycle is drawn in blue line and yellow line and noted by “B” reaction and “C” reaction, respectively.
+
 
                                                 See more detail in <a class="link" href="https://2018.igem.org/Team:NCKU_Tainan/Kinetic_Law">Kinetic law</a>.
 
                                                 See more detail in <a class="link" href="https://2018.igem.org/Team:NCKU_Tainan/Kinetic_Law">Kinetic law</a>.
                                            </p>
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                                            </p>
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                                         </div>
 
                                         </div>
 
                                     </div>
 
                                     </div>
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                                                         <tr>
 
                                                         <tr>
 
                                                             <th colspan="8">CO<sub>2</sub> bypass pathway</th>
 
                                                             <th colspan="8">CO<sub>2</sub> bypass pathway</th>
                                                             <th colspan="3">Vmax (1/S)</th>
+
                                                             <th colspan="3">V<sub>max</sub> (1/S)</th>
                                                             <th colspan="3">KM (mM)</th>                                                         
+
                                                             <th colspan="3">K<sub>M</sub> (mM)</th>                                                         
 
                                                         </tr>
 
                                                         </tr>
 
                                                         <tr>
 
                                                         <tr>
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                                                             <td rowspan="2" colspan="2">A4</td>
 
                                                             <td rowspan="2" colspan="2">A4</td>
 
                                                             <td rowspan="2" colspan="6">$${RuBP + CO_2 \xrightarrow{RuBisCO} 3PG}$$</td>
 
                                                             <td rowspan="2" colspan="6">$${RuBP + CO_2 \xrightarrow{RuBisCO} 3PG}$$</td>
                                                             <td colspan="2">Vmax</td>
+
                                                             <td colspan="2">V<sub>max</sub></td>
                                                             <td colspan="2">Krubp</td>
+
                                                             <td colspan="2">K<sub>rubp</sub></td>
                                                             <td colspan="2">KCO<sub>2</sub></td>
+
                                                             <td colspan="2">K<sub>CO</sub><sub>2</sub></td>
 
                                                         </tr>
 
                                                         </tr>
 
                                                         <tr>
 
                                                         <tr>
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                                                         <tr>
 
                                                         <tr>
 
                                                             <th colspan="13">Pentose Phosphate Pathway</th>
 
                                                             <th colspan="13">Pentose Phosphate Pathway</th>
                                                             <th colspan="6">Vmax (1/S)</th>
+
                                                             <th colspan="6">V<sub>max</sub> (1/S)</th>
                                                             <th colspan="6">KM (mM)</th>                                                         
+
                                                             <th colspan="6">K<sub>M</sub> (mM)</th>                                                         
 
                                                         </tr>
 
                                                         </tr>
 
                                                         <tr>
 
                                                         <tr>
Line 370: Line 380:
 
                                                             <td rowspan="2" colspan="1">B6</td>
 
                                                             <td rowspan="2" colspan="1">B6</td>
 
                                                             <td rowspan="2" colspan="12">$${DHAP \longleftrightarrow GAP}$$</td>
 
                                                             <td rowspan="2" colspan="12">$${DHAP \longleftrightarrow GAP}$$</td>
                                                             <td colspan="3">Vmf</td>
+
                                                             <td colspan="3">V<sub>mf</sub></td>
                                                             <td colspan="3">Vmr</td>
+
                                                             <td colspan="3">V<sub>mr</sub></td>
                                                             <td colspan="3">Km<sub>DHAP</sub></td>
+
                                                             <td colspan="3">K<sub>m</sub><sub>DHAP</sub></td>
                                                             <td colspan="3">Km<sub>GAP</sub></td>                                                   
+
                                                             <td colspan="3">K<sub>m</sub><sub>GAP</sub></td>                                                   
 
                                                         </tr>
 
                                                         </tr>
 
                                                         <tr>
 
                                                         <tr>
Line 402: Line 412:
 
                                                             <td rowspan="2" colspan="1">B10</td>
 
                                                             <td rowspan="2" colspan="1">B10</td>
 
                                                             <td rowspan="2" colspan="12">$${G6P + NADP^+ \rightarrow 6PG + NADPH}$$</td>
 
                                                             <td rowspan="2" colspan="12">$${G6P + NADP^+ \rightarrow 6PG + NADPH}$$</td>
                                                             <td colspan="4">Vmax</td>
+
                                                             <td colspan="4">V<sub>max</sub></td>
                                                             <td colspan="4">Km<sub>G6P</sub></td>
+
                                                             <td colspan="4">K<sub>m</sub><sub>G6P</sub></td>
                                                             <td colspan="4">Km<sub>NADP</sub></td>
+
                                                             <td colspan="4">K<sub>m</sub><sub>NADP</sub></td>
 
                                                         </tr>
 
                                                         </tr>
 
                                                         <tr>
 
                                                         <tr>
Line 452: Line 462:
 
                                                         <tr>
 
                                                         <tr>
 
                                                             <th colspan="13">TCA cycle</th>
 
                                                             <th colspan="13">TCA cycle</th>
                                                             <th colspan="3">Vmf (mM/min)</th>
+
                                                             <th colspan="3">V<sub>mf</sub> (mM/min)</th>
                                                             <th colspan="3">Vmr (mM/min)</th>
+
                                                             <th colspan="3">V<sub>mr</sub> (mM/min)</th>
                                                             <th colspan="3">Ks (mM)</th>  
+
                                                             <th colspan="3">K<sub>s</sub> (mM)</th>  
                                                             <th colspan="3">Kp (mM)</th>                                                       
+
                                                             <th colspan="3">K<sub>p</sub> (mM)</th>                                                       
 
                                                         </tr>
 
                                                         </tr>
 
                                                         <tr>
 
                                                         <tr>
Line 540: Line 550:
 
                                                             <td rowspan="2" colspan="1">C11</td>
 
                                                             <td rowspan="2" colspan="1">C11</td>
 
                                                             <td rowspan="2" colspan="12">$${PYR \rightarrow NADH + AcCoA + CO_2}$$</td>
 
                                                             <td rowspan="2" colspan="12">$${PYR \rightarrow NADH + AcCoA + CO_2}$$</td>
                                                             <td colspan="6">Vmax (1/s)</td>
+
                                                             <td colspan="6">V<sub>max</sub> (1/s)</td>
                                                             <td colspan="6">KM (mM)</td>
+
                                                             <td colspan="6">K<sub>m</sub> (mM)</td>
 
                                                         </tr>
 
                                                         </tr>
 
                                                         <tr>
 
                                                         <tr>
Line 566: Line 576:
 
                                                             <td rowspan="2" colspan="1">C14</td>
 
                                                             <td rowspan="2" colspan="1">C14</td>
 
                                                             <td rowspan="2" colspan="12">$${ICIT \rightarrow SUCC + GOX}$$</td>
 
                                                             <td rowspan="2" colspan="12">$${ICIT \rightarrow SUCC + GOX}$$</td>
                                                             <td colspan="3">Vmf (mM/min)</td>
+
                                                             <td colspan="3">V<sub>mf</sub> (mM/min)</td>
                                                             <td colspan="3">Vmr (mM/min)</td>
+
                                                             <td colspan="3">V<sub>mr</sub> (mM/min)</td>
                                                             <td colspan="2">Kicit (mM)</td>
+
                                                             <td colspan="2">K<sub>icit</sub> (mM)</td>
                                                             <td colspan="2">Ksucc (mM)</td>
+
                                                             <td colspan="2">K<sub>succ</sub> (mM)</td>
                                                             <td colspan="2">Kgox (mM)</td>
+
                                                             <td colspan="2">K<sub>gox</sub> (mM)</td>
 
                                                         </tr>
 
                                                         </tr>
 
                                                         <tr>
 
                                                         <tr>
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                                             <p class="pcontent">Two main sources of CO<sub>2</sub> metabolism in engineered <i>E. coli</i> are xylose and CO<sub>2</sub>.  
 
                                             <p class="pcontent">Two main sources of CO<sub>2</sub> metabolism in engineered <i>E. coli</i> are xylose and CO<sub>2</sub>.  
 
                                                 CO<sub>2</sub> utilization rate varies under different condition.  
 
                                                 CO<sub>2</sub> utilization rate varies under different condition.  
                                                 We use 5% CO<sub>2</sub> (about 2.6 mM) and 0.4% (about 26 mM) xylose in experiment as an optimization CO<sub>2</sub> utilization rate.  
+
                                                 We use 5% CO<sub>2</sub> (about 2.6 mM) and 4 (g/l) xylose (about 26 mM) in experiment as an optimization CO<sub>2</sub> utilization rate.  
 
                                                 Constant CO<sub>2</sub> condition and limited CO<sub>2</sub> condition also effects metabolism performance.  
 
                                                 Constant CO<sub>2</sub> condition and limited CO<sub>2</sub> condition also effects metabolism performance.  
 
                                                 In other words, open system and close system showed different results.  
 
                                                 In other words, open system and close system showed different results.  
Line 751: Line 761:
 
                                     </div>
 
                                     </div>
  
                                     <div id="reference">
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                                     <div id="references">
                                         <h3>Reference</h3>
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                                         <h3>References</h3>
 
                                         <ol>
 
                                         <ol>
                                             <li class="smallp">Jacqueline E. G, Christopher P. L, Maciek R. A. Comprehensive analysis of glucose and xylose metabolism in Escherichia coli under aerobic and anaerobic conditions by 13C metabolic flux analysis. Metab Eng. 2017 Jan; 39: 9–18.</li>
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                                             <li class="smallp">E. G. Jacqueline, P. L. Christopher, R. A. Maciek,  Comprehensive analysis of glucose and xylose metabolism in <i>Escherichia coli</i> under aerobic and anaerobic conditions by <sup>13</sup>C metabolic flux analysis. Metab Eng. 2017 Jan; 39: 9–18.</li>
                                             <li class="smallp">Uwe Sauer, Bernhard J. E. The PEP—pyruvate—oxaloacetate node as the switch point for carbon flux distribution in bacteria. FEMS Microbiology Reviews, Volume 29, Issue 4, 1 September 2005, Pages 765–794.</li>
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                                             <li class="smallp">U. Sauer, J. E. Bernhard, The PEP—pyruvate—oxaloacetate node as the switch point for carbon flux distribution in bacteria. FEMS Microbiology Reviews, Volume 29, Issue 4, 1 September 2005, Pages 765–794.</li>
                                             <li class="smallp">Fuyu G, Guoxia L, Xiaoyun Z, Jie Z, Zhen C and Yin L. Quantitative analysis of an engineered CO2-fixing Escherichia coli reveals great potential of heterotrophic CO2 fixation. Gong et al. Biotechnology for Biofuels, 2015, 8:86.</li>
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                                             <li class="smallp">G. Fuyu, L. Guoxia, Z. Xiaoyun, Z. Jie, C. Zhen, L. Yin . Quantitative analysis of an engineered CO<sub>2</sub>-fixing <i>Escherichia coli</i>reveals great potential of heterotrophic CO<sub>2</sub> fixation. Gong et al. Biotechnology for Biofuels, 2015, 8:86.</li>
                                             <li class="smallp">Y. Pocker, and Joan S. Y. Ng. Plant carbonic anhydrase. Properties and carbon dioxide hydration kinetics. Biochemistry, 1973, 12 (25), pp 5127–5134.</li>
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                                             <li class="smallp">Y. Pocker, S. Y. Ng. Joan, Plant carbonic anhydrase. Properties and carbon dioxide hydration kinetics. Biochemistry, 1973, 12 (25), pp 5127–5134.</li>
 
                                         </ol>
 
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Latest revision as of 01:25, 18 October 2018

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