Design
The CRC targeting module enables bacteria to specifically adhere to CRC lesions in the lumen. To this end, E.coli is designed to display a CRC antigen binding moiety on its surface, through which it can be tethered on the foci of CRC. For surface display vectors, we choose two engineered bacterial outer membrane proteins—OmpA (BBa_K1489002) and ice nucleation protein [1] [1] [1]Bao, S., Yu, S., Guo, X., Zhang, F., Sun, Y., & Tan, L., et al. (2015). Construction of a cell-surface display system based on the n-terminal domain of ice nucleation protein and its application in identification of mycoplasma adhesion proteins. Journal of Applied Microbiology, 119(1), 236-244. , which are commonly used as carriers of protein/peptide to the outer surface of gram-negative bacteria.
Section2
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Section3
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2018 Interlab Plate Reader ProtocolProtocols/Transformation
section4
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Fig 1. The particle standard curve obtained form the 2nd calibration experiment.
xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx.
The table template is here.
Table 1. Colony forming units per 0.1 OD600
| samples | dilution factor | CFU/mL | ||
|---|---|---|---|---|
| 8×104 | 8×105 | 8×106 | ||
| 1.1 | TNTC | 48 | 11 | 3.84E+07 |
| 1.2 | 248 | 41 | 10 | 3.28E+07 |
| 1.3 | 172 | 54 | 5 | 4.32E+07 |
| 2.1 | TNTC | 143 | 20 | 1.14E+08 |
| 2.2 | TNTC | 153 | 25 | 1.22E+08 |
| 2.3 | TNTC | 151 | 18 | 1.21E+08 |
| 3.1 | TNTC | 119 | 16 | 9.52E+07 |
| 3.2 | TNTC | 125 | 19 | 1.00E+08 |
| 3.3 | TNTC | 89 | 18 | 7.12E+07 |
| 4.1 | TNTC | 209 | 16 | 1.67E+08 |
| 4.2 | TNTC | 130 | 17 | 1.04E+08 |
| 4.3 | TNTC | 164 | 10 | 1.31E+08 |
Section5
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