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<p> 限制性内切酶可以根据其酶切方式的不同分为4类,分别为TypeI、TypeII、TypeIII和TypeIV。我们常用的限制性核酸内切酶,如EcoRI,都属于II型限制性核酸内切酶,这一类限制性内切酶可以识别特异性的4~8个核苷酸序列,识别序列反向重复,且切割位点位于识别位点内,酶切后产生粘性末端或者平末端,其切割示意图如下
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但是,Type IIS限制性内切酶则是一种相对特殊的酶,与普通的Type II限制性内切酶相比,这类酶会在识别位点下游切割DNA,从酶的三维结构分析,这是由于Type IIS限制性内切酶的识别区域和催化区域被一个多肽连接子分开。
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TypeIIS限制性内切酶的优点在于其对于切割序列没有要求,识别序列外的位置可以是任意序列,多个DNA片段可以通过互补的末端进行组装,这种组装方法又叫做Goldengate。
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Revision as of 14:55, 28 September 2018

CONSTRUCTION


Construction

  • Type IIs Restriction Endonuclease

    限制性内切酶可以根据其酶切方式的不同分为4类,分别为TypeI、TypeII、TypeIII和TypeIV。我们常用的限制性核酸内切酶,如EcoRI,都属于II型限制性核酸内切酶,这一类限制性内切酶可以识别特异性的4~8个核苷酸序列,识别序列反向重复,且切割位点位于识别位点内,酶切后产生粘性末端或者平末端,其切割示意图如下 但是,Type IIS限制性内切酶则是一种相对特殊的酶,与普通的Type II限制性内切酶相比,这类酶会在识别位点下游切割DNA,从酶的三维结构分析,这是由于Type IIS限制性内切酶的识别区域和催化区域被一个多肽连接子分开。 TypeIIS限制性内切酶的优点在于其对于切割序列没有要求,识别序列外的位置可以是任意序列,多个DNA片段可以通过互补的末端进行组装,这种组装方法又叫做Goldengate。

  • References

    • Dai H, Wang Y, Lu X, et al. Chimeric antigen receptors modified T-cells for cancer therapy[J]. JNCI: Journal of the National Cancer Institute, 2016, 108(7).
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